哪些蛋白质可用紫外吸收法测浓度

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/05 09:09:17

哪些蛋白质可用紫外吸收法测浓度
哪些蛋白质可用紫外吸收法测浓度

哪些蛋白质可用紫外吸收法测浓度
由于蛋白质中存在着含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,因此蛋白质溶液在280nm处具有紫外吸收高峰.在一定浓度范围内,蛋白质溶液在此波长处的吸光度与其浓度呈正比关系,因此利用这一性质可进行蛋白质定量测定.
该法迅速、简便、不消耗样品、低浓度盐类不干扰测定,可测定0.1.0mg/mL的蛋白质溶液.
由于蛋白质的紫外吸收高峰常因pH变化而改变,故应用此法时要注意溶液的pH.最好样品的pH与标准曲线制定时的pH一致.
本法对于测定与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质误差较大,故适用于测定与标准蛋白质酪氨酸、色氨酸这类氨基酸含量相仿的样品；若样品中含有嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质,会出现较大干扰.例如混有核酸,核酸可吸收波长为280nm的紫外光,但它对260nm紫外光吸收更强.而蛋白质恰恰相反,280nm的紫外吸收值大于260nm紫外吸收值.运用280/260吸收差法则可以适当校正核酸对蛋白质浓度测定的干扰作用.
蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质.只要有共轭双键等不饱和键的蛋白质分子都可以溶解制成一定浓度溶液后后用紫外吸光法测定.
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